在临床检验技术笔试的《分子生物学检验》模块中，PCR、基因测序与新冠核酸检测流程构成了入门学习的“铁三角”，三者既是技术基石 ，也是理解现代分子诊断逻辑的核心线索。
PCR技术作为分子扩增的“引擎 ” ，其核心价值在于以指数级放大微量核酸，让原本难以检测的靶标变得可见 ，笔试中需重点把握引物设计的特异性 、Taq酶的耐热性及三步温控的精确性——这些细节直接决定扩增效率 ，临床应用中，PCR的灵敏度（可检出10-3-10拷贝/μL）使其成为病原体检测的“金标准 ” ，但假阳性的风险也提醒我们 ，防污染措施（如UNG酶系统 、分室操作）与内参设置同样不可忽视 。
基因测序则从“定性”走向“精准定量 ”，一代测序（Sanger法）虽通量低 ，但仍是验证突变的“金标准 ”；二代测序（NGS）的高通量与低成本 ，使其在肿瘤用药指导、遗传病筛查中爆发式应用，笔试需厘清NGS的“建库-捕获-测序-生信分析”流程 ，尤其要注意测序深度（如肿瘤检测需≥500×）与覆盖度对结果的影响 ，与PCR的“靶向检测 ”不同，测序更强调“全景式 ”分析，但数据解读的复杂性也对从业者的生物信息学能力提出更高要求 。
新冠核酸检测流程则是理论与实践的完美结合,从样本采集（咽拭子需触及咽后壁）到核酸提取（磁珠法自动化） ，再到RT-PCR扩增（ORF1ab/N基因双靶标设计） ，每一步都藏着质控“雷区”，裂解不充分会导致核酸释放不足 ，而逆转录效率低下则直接造成假阴性 ，笔试中，Ct值的意义（≤35为阳性 ，40为阴性阈值）及内标（如RNase P基因）的作用常是考点——内标失效提示样本质量或操作问题 ，需重新检测。
三者并非孤立存在：PCR是测序的前置步骤，新冠检测则是PCR技术的标准化应用 ，对考生而言 ，理解“原理-操作-质控 ”的逻辑链条，比死记硬背步骤更重要 ，唯有掌握技术的底层逻辑 ，才能在笔试中游刃有余，未来在临床实践中真正发挥分子诊断的“火眼金睛 ”价值 。